产品描述

TGX-221 是一种p110β-特定的抑制剂，在无细胞试验中IC50为 5 nM，作用于p110β的选择性是作用于p110α的1000倍。

靶点（IC50 & Targe）

p110α,5μM

p110β,5nM

p110γ,>10μM

p110δ,0.1μM

体外研究

使用重组p85/p110，进行体外PI3K实验，测定TGX-221作用于不同亚型的活性，TGX-221有效且高度选择性作用p110β，作用于PI3K p110β和PI3K p110δ时, IC50 分别为8.5和211 nM。而且,TGX-221作用于J774.2巨噬细胞，局部降低胰岛素诱导的PKB在Ser473位点磷酸化。[1] TGX-221作用于体外循环(ECC)模型，抑制血小板-ECC相互作用, 血小板凝聚，和血小板-粒细胞结合。[2] 最新研究显示,用0.2, 2,和 20 μM TGX-221处理PC3细胞，抑制增殖，且明显降低p110β PI3K亚型的活性。[3]

体内研究

作为抗血栓形成的药剂, TGX-221按1+1(49±13.9%)和3+3(88±10.6%)剂量处理小鼠模型，30分钟后，提高综合性血流量。此外, TGX-221按3+3(平均值1560)和1+1 (1305)剂量处理，提高尾出血时间(BT)和平均肾脏BT。[4]

激酶实验

脂质激酶活性实验:

使用标准脂质激酶活性，及PI作为底物测定IC50值(i)使用100 μM 冰冻ATP代替10 μM, (ii)DMSO浓度为1%, (iii)使用γ-33PATP代替γ-32PATP。使用感光成像仪扫描测量TLC板。使用重组蛋白进行至少三组独立实验，通过回归曲线分析测定IC50值。

细胞实验

Cell lines: PC3细胞

Concentrations: 0.2到20 μM

Incubation Time: 24-72小时

Method: 测定增殖,细胞接种在96孔培养板上，重复2份，温育过夜，使细胞粘附。细胞和TGX-221温育24,48,和72小时。指定的时间间隔,通过结晶紫染色比色法量化细胞。加入100 μl 2.5%戊二醛溶液和细胞混合，然后在室温下温育30分钟。板侵泡在PBS溶液中洗三次。 烘干板，然后加入100 μL 0.1%溶于去离子水的结晶紫溶液染色，然后在室温下温育20分钟，用去离子水大面积冲洗，移除过量染料，然后烘干板，然后把染料溶化在100 μL 10% 乙酸中。使用酶标仪在570 nm处直接测量染料抽提物的光密度。

(Only for Reference)

动物实验

Animal Models: 患FeCl3诱导的动脉血栓鼠

Formulation: TGX-221 溶于 10% 乙醇, 10% 樟脑, 10% N,N-二甲基乙酰胺, 70% 蒸馏水

Dosages: 0.3 + 0.3, 1 + 1, 3 + 3 mg/kg + mg/kg/hour

Administration: 静脉注射

(Only for Reference)

参考文献

[1] Chaussade C, et al. Biochem J. 2007, 404(3), 449-458.

[2] Straub A, et al. Thromb Haemost. 2008, 99(3), 609-615.

[3] Lu XY, et al. Appl Microbiol Biotechnol. 2011, 89(5), 1423-1433.

[4] Bird JE, et al. Thromb Res. 2011, 127(6), 560-564.

[5] Jackson SP, et al. Nat Med. 2005, 11(5), 507-514.