产品描述

Cytarabine是一种抗代谢药，也是DNA synthesis抑制剂，在野生型CCRF-CEM细胞中IC50为16 nM。

靶点（IC50 & Targe）

DNA synthesis,16nM

体外研究

Cytarabine (AraC)磷酸化为含脱氧胞啶激酶(dCK)的三磷酸盐形式 (Ara-CTP),与dCTP 竞争进入DNA中, 通过抑制DNA和 RNA 聚合酶功能而 抑制DNA合成 。Cytarabine作用于野生型CCRF-CEM 细胞，抑制生长活性比其他急性骨髓性白血病高很多，IC50为 16 nM。[1] 浓度不断提高的 Cytarabine (IC50 为0.69 μM) 作用于敏感大鼠白血病细胞系RO/1，导致代谢活性降低, 且作用于人类野生型dCK (IC50 为 0.037 μM) 而不是失活型选择性拼接的dCK形式时增强细胞毒性。[2]10 μM Cytarabine 作用于大鼠交感神经元，诱导凋亡, 100 μM 时毒性最高，作用于神经元84小时，可杀死80%神经元，包含线粒体细胞色素-c的释放， caspase-3的激活， 抑制p53基因 可降低毒性，删除bax基因可延迟但是不会阻断毒性。[3]

体内研究

Cytarabine高效作用于急性白血病，引起G1/S期停顿和同步化， 且低剂量时提高患白血病Brown Norway大鼠存活时间，说明使用高剂量Cytarabine 与抗人类白血病效果没有关系。[4] Cytarabine按 250 mg/kg剂量 作用于妊娠 Slc:Wistar大鼠的胎盘，也引起胎盘生长受阻，且提高胎盘滋养细胞凋亡，处理3小时开始提高，6小时达到最高峰，48小时恢复到对照组水平，且明显增强 p53蛋白, p53转录靶点基因，如p21, cyclinG1 ，fas，和 caspase-3活性。[5]

激酶实验

体外抑制生长实验:

Cytarabine储存液储备在无水乙醇中，制备连续稀释的Cytarabine。CCRF-CEM 细胞悬浮在含10% FBS, 0.1% Gentamicin,和 1%丙酮酸钠的RPMI培养基上。 按每mL 3-6×104个细胞密度细胞悬浮在各自培养基中，获得10 mL细胞悬浮液。合适体积 Cytarabine溶液转移到细胞悬浮液中，再温育72小时。细胞旋转减慢，再次悬浮在新鲜无Cytarabine培养基中，测定最终细胞数。通过分析细胞数与Cytarabine浓度的S曲线拟合, 而测定IC50。

细胞实验

Cell lines: 大鼠白血病细胞系RCL/0, RO/1和 K7,及人类单核细胞性白血病细胞U937

Concentrations: 100 μM 左右

Incubation Time: 24,48和72小时

Method: 37oC下，不同浓度Cytarabine处理细胞24,48,和72小时。在处理 20,44,或68小时时，加入10 mL细胞增殖试剂WST-1溶液。和WST-1温育2或4小时后，使用比色分析测定细胞代谢活力,在450 nm处测定吸光值。通过eosin染色计算细胞分裂倍数，及细胞活性。

(Only for Reference)

动物实验

Animal Models: 患髓细胞性白血病的Brown Norway大鼠

Formulation: 溶于PBS (pH 7.0)

Dosages: 5-1000 mg/kg

Administration: 静脉注射

(Only for Reference)

参考文献

[1] Tobias SC, et al. Mol Pharm, 2004, 1(2), 112-116.

[2] Veuger MJ, et al. Blood, 2002, 99(4), 1373-1380.

[3] Besirli CG, et al. Cell Death Differ, 2003, 10(9), 1045-1058.

[4] Richel DJ, Br J Cancer, 1988, 58(6), 730-733.

[5] Yamauchi H, et al. Biol Reprod, 2004, 70(6), 1762-1767.