产品描述

FR 180204 是一种ATP-竞争性的选择性的ERK抑制剂，其作用于ERK1和ERK2的Ki分别为0.31 μM 和 0.14 μM。它对相关激酶p38α的抑制效果要弱30倍，在<30 μM时，对MEK1、MKK4、IKKα、PKCα、Src、Syc和PDGFα没有抑制作用。

靶点（IC50 & Targe）

ERK1,0.31μM(Ki)

ERK2,0.14μM(Ki)

体外研究

在AP-1转染的细胞中，FR 180204剂量依赖性抑制AP-1反式激活，IC50 为3.1 μM。[1] FR 180204抑制自发性间皮瘤细胞生长。[3]

体内研究

在胶原诱导性关节炎的小鼠体内，FR180204 (100 毫克/千克，腹腔注射，b.i.d.)显著减少症状恶化和体重损失。[2]在注射登革病毒(DENV)的小鼠模型中，FR180204限制肝细胞凋亡，减少DENV诱导的肝脏损伤，并提高临床指标。[4]

激酶实验

ERK 试验:

Nunc-Immuno MaxiSorp板在磷酸缓冲盐水(PBS)中用20微克/毫升MBP溶液涂覆。用包含0.05% Tween 20 (T-PBS)的PBS洗涤后，每孔中加入封闭缓冲液(包含 3% BSA的T-PBS)，板在室温下培育10分钟。用T-PBS洗涤后，在测试缓冲液(20 mM Mops，pH 7.2，25 mM β-甘油磷酸盐， 5 mM EGTA，1 mM 原钒酸钠，1 mM 二硫苏糖醇，和50 微克/毫升BSA)中稀释的化学化合物，ATP和重组ERK2加入到每个孔中。载体组(包含 0.1% DMSO)和除去激酶组作为对照和基础测定。在室温下培育1小时后，板用T-PBS洗涤两次。抗-磷酸MBP抗体(0.2 微克/毫升)加入到每孔中，将板在室温下培育1小时。洗涤后，加入抗-小鼠HRP共轭的多克隆抗体，将板再培育30分钟。SuperSignal化学发光底物根据制造商的说明用于HRP活性的测定。Prism 4.0软件用于Lineweaver–Burk图的分析，IC50 和 Ki的测定。

细胞实验

Cell lines: Met5A,MSTO-211H,NCI-H28,NCI-H2052,和 NCIH2452 细胞系

Concentrations: 10 μM

Incubation Time: 48小时

Method:细胞活性使用MTT法测定。MTT活性细胞在570 nm吸光度下使用微板阅读器量化。

(Only for Reference)

动物实验

Animal Models: 胶原诱导性关节炎小鼠模型

Formulation: 悬浮在0.1%甲基纤维素溶液中

Dosages: 100 毫克/千克

Administration: 腹腔注射

(Only for Reference)

参考文献

[1] Ohori M, et al. Biochem Biophys Res Commun. 2005, 336(1), 357-363.

[2] Ohori M, et al. Naunyn Schmiedebergs Arch Pharmacol. 2007, 374(4), 311-316.

[3] Honda M, et al. Cell Physiol Biochem. 2012, 29(5-6), 667-674.

[4] Sreekanth GP, et al. Virus Res. 2014, 188, 15-26.