饮料中两种甜味剂的测定 -百灵威

经常食用甜味剂超标的食品会对人的健康造成危害。

安赛蜜，即乙酰磺胺酸钾，是一种甜味。我国规定饮料中安赛蜜的最大限值为3.0g/kg。

纽甜是一种功能性甜味剂，甜度比蔗糖高7000～13000倍，比阿斯巴甜高30～60倍。纽甜的使用范围为各类食品饮料，使用量为一般饮料类8-17mg/L，食品类10-35mg/kg。

本文建立了固相萃取-高效液相色谱法测定饮料中两种甜味剂的方法，其中纽甜的测定主要适用于碳酸饮料。

安赛蜜的测定

样品前处理

一、样品加标

移取2.5mL市售饮料于50mL离心管中，分别向其中加入100μL、500μL、1000μL的乙酰磺胺酸钾标准贮备液，进行三个水平的加标试验，且做平行样本（n=3）。

二、样品净化及浓缩（2471238中性氧化铝柱，500mg/6mL）

将上述样品分别用20mL左右超纯水稀释，混匀后8000rpm离心5min，上清液全部转入中性氧化铝柱（使用前用5mL超纯水活化），收集过滤液，待水溶液流至柱表面时，加入2.5mL流动相（甲醇：20mmol/L乙酸铵=3:97），合并收集过滤液，用流动相定容至25mL，混匀后，超声脱气，过0.22μm尼龙滤膜上机测试。

三、基质空白试验

称取试样（不加标准样品-乙酰磺胺酸钾），按上述步骤进行实验。

分析检测

一、液相色谱条件

色谱柱： C18（4.6mm*250mm，5um）
检测器：紫外检测器
检测波长：230nm
流动相：A：甲醇 B：20mmol/L乙酸铵
洗脱方式：等度洗脱（A：B=3：97）
流速：0.8mL/min
进样体积：10µL

二、检测结果

1、校正曲线及色谱图

图1 乙酰磺胺酸钾标准曲线

图2 饮料本底的液相色谱图

图3 饮料中乙酰磺胺酸钾的液相色谱图（加标浓度4.00μg/g）

2、加标回收率结果

表1 饮料中乙酰磺胺酸钾加标回收率结果

纽甜的测定

样品前处理

一、样品提取

取一定量饮料加入烧杯，超声脱气；准确称取除气的饮料10.0mL于50mL离心管中，加入混合提取液（0.8mL甲酸+2.5mL三乙胺加水定容至1000mL，pH约为4.5）30mL，涡旋震荡2min，超声15min，用混合提取液定容至50mL，4000r/min离心10min，过滤备用。

二、样品净化及浓缩（973436C18小柱，500mg/6mL）

活化：C18固相萃取柱使用前用5mL甲醇、5mL水活化。
上样和洗脱：加入10mL待净化液于固相萃取柱中，用5mL混合提取液淋洗固相萃取柱，弃去流出液，抽干小柱；用6mL甲醇洗脱，收集洗脱液。
重新溶解：洗脱液于40℃下氮吹至近干，用1mL混合提取液溶解，经0.22µm滤膜过滤，供高效液相色谱测定。

分析检测

一、液相色谱条件

色谱柱： C18（4.6mm*250mm，5um）
检测器：紫外检测器
检测波长：218nm
流动相：A：乙腈 B：离子对试剂（2.0g辛烷磺酸钠用500mL水溶解，加入1mL磷酸；加水定容至1000mL）
洗脱方式：梯度洗脱

流速：1.0mL/min
进样体积：20µL

二、检测结果

表2 10.0mg/kg饮料中纽甜的添加回收结果

图4 添加水平为10.0mg/kg饮料中纽甜检测的液相色谱图

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Neotame, 98%, reference material 纽甜	165450-17-9	621737
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Formic acid, 98%, for analysis 甲酸	64-18-6	965653 危化品
Ammonium acetate, 98%, for analysis 乙酸铵	631-61-8	925211
1-Octanesulfonic acid sodium salt monohydrate, 99.5%, for ion-pair chromatography 1-辛烷磺酸钠盐一水合物	207596-29-0	965647
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