由于糖链本身没有发色基团,而且其在质谱中上不易离子化,为了在分离纯化和结构鉴定过程中能够更有效地检测到糖链,一般需要在糖链检测前进行柱前衍生化。其中还原胺化法由于产物稳定而成为糖链还原端常用的衍生化方法之一,但上述方法通常需要高温和较长的反应时间,这可能导致一些热敏聚糖降解或者结构改变,还原端异构化和开环、或导致部分唾液酸水解丢失。此外在还原胺化反应中难免加入过量的还原剂,这可能会对后续的糖链的检测产生一定影响。
PNGase F是N-糖链释放中最常用的酶,其作用于糖链与氨基酸之间的化学键,使释放后的糖链还原端生成暴露的氨基官能团。针对于此,4-CEBTPP的开发,可针对PNGase F释放的N-糖链暴露的氨基官能团进行标记,从而建立高灵敏、高选择性的生物体内微量糖链分析方法及含氨基官能团代谢物分析方法,这对探索和筛选真正有效的糖链生物标志物和含氨基官能团生物标志物,具有重要意义。
延边大学闵俊哲教授开发了一种质谱衍生化试剂
——4-CEBTPP,以三苯基膦(Triphenylphospine)化学结构为母体,带有永久正电荷,可提高待测物在正离子模式下的响应强度。此外4-CEBTPP结构中具有羧基官能团可靶向识别具有氨基官能团的化合物,适用于复杂生物样品的分析,比如:代谢组学和糖组学中含胺化合物,可提高含胺化合物在质谱中的检测灵敏度和选择性。
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产品优势
• 纯度高:96%;
• 灵敏度高:可对经PNGase F释放后的糖链进行标记,提高糖链在质谱的检测灵敏度(图1);
• 高选择性:胎球蛋白中7种低聚糖与4-CEBTPP衍生物的质量色谱图及质谱图(图2);
图1Hydrolysis of polypeptide-asparagine-linked sialylglycopeptide(SGP)by PNGaseF And derivative reaction between 4-CEBTPP with SGA.[1]
图2 Precursor ion scan MS chromatograms and spectra obtained from the derivative reaction of oligosaccharides with 4-CEBTPP in fetuin. Panel A: Precursor ion scan MS chromatograms; B: MS Precursor ion spectra in ESI+ mode. S: N-acetylneuraminic acid; G: Galactose; M: Mannose; N: N-acetylglucosamin.[1]
百灵威独家提供延边大学教授-闵俊哲科研成果—— 4-CEBTPP
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品名 | CAS | 货号 |
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[4-(Methyl) phenyl-2-propionyl]-triphenylphosphonium bromide (4-cebtpp), 96% 4-(甲基)苯基-2-丙酰基]-三苯基溴化膦 | / | 9426275
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个人简介
闵俊哲,药学博士,教授,博士生导师,药物分析学科带头人,吉林省百名高层次创新创业人才、图们江学者、西部之光访问学者、全国药物分析技术分会常务委员。日本静冈县立大学客座教授,Frontiers in chemistry杂志副主编。现主要致力于手性代谢组学、糖组学高灵敏度质谱探针的开发及应用;中药/民族药复方制剂的作用机理研究;慢性疾病早期预警及诊断用非侵袭性试剂盒的开发。在日本任教期间主持完成日本文部科学省项目3项(相当于中国面上项目2项,重点项目1项),其他财团、日本科学技术振兴机构项目等共3项。现主持和完成国家自然科学基金项目4项,省部级项目4项。发表SCI论文130余篇,已授权发明专利6项(日本3项,中国3项)。已培养“青年图们江学者”等优秀博士毕业生十余名。
参考文献
- Ma Q, Man X, Xu CY, et al. Simultaneous determination of chiral homocysteine, cysteine and glutathione, in serum from humans at normal and stress states using ultrahigh-performance liquid chromatography coupled to quadrupole-Orbitrap high resolution mass spectrometry[J], Journal of Chromatography A, 2021, 1642, 462028.
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