产品描述

PHA-680632是有效的Aurora A，Aurora B和Aurora C抑制剂，IC50分别为27 nM， 135 nM 和120 nM，比作用于FGFR1， FLT3， LCK， PLK1， STLK2，和VEGFR2/3的IC50值高10到200倍。

靶点（IC50 & Targe）

Aurora A IC50 27 nM [1]

Aurora C IC50 120 nM [1]

Aurora B IC50 135 nM [1]

FGFR1 IC50 390 nM [1]

PLK1 IC50 780 nM [1]

FLT3 IC50 820 nM [1]

VEGFR3 IC50 1000 nM [1]

VEGFR2 IC50 1920 nM [1]

LCK IC50 1950 nM [1]

体外研究

PHA-680632有效抑制全部三种Aurora激酶，作用于Aurora A,B,和C 时，IC50分别为27,135和120 nM。PHA-680632选择性作用于Aurora激酶, IC50值比作用于FGFR1, FLT3,LCK,PLK1,STLK2,VEGFR2,和VEGFR3高10到200倍,作用于另外22激酶时IC50值大于10 μM。PHA-680632作用于多种细胞系具有抗增殖效果,包括HeLa,HCT116, HT29,LOVO,DU145,和NHDF细胞，IC50 为0.06-7.15 μM。0.5 μM PHA-680632作用于肿瘤细胞，造成多倍性。PHA-680632的活性机制和抑制Aurora激酶相一致。[1] PHA-680632 和放射处理联合处理，导致作用于肿瘤细胞效果增强，尤其作用于p53缺陷细胞。100-400 nM PHA680632和电离辐射联合处理p53缺陷的 HCT116细胞，而不是p53野生型 细胞，提高辐射诱导膜联蛋白V阳性细胞, 微核形成,和Brca1集落形成。[2]

体内研究

PHA-680632按15-60 mg/kg剂量作用于携带HL60,A2780,和 HCT116细胞的移植瘤鼠模型，通过降低肿瘤细胞增殖和促进凋亡，抑制肿瘤生长。PHA-680632按45 mg/kg剂量作用于携带乳房肿瘤病毒v-Ha-ras转基因鼠，抑制激活的ras驱动的乳房肿瘤生长，导致全部肿瘤稳定化，部分肿瘤衰退。[1]

激酶实验

Aurora 激酶抑制实验:

使用闪烁接近法格式测定PHA-680632抑制激酶活性的效果。有γ33-ATP的ATP存在时通过激酶磷酸化生物素化底物。使用链霉亲和素包被的闪烁接近法珠获得磷酸化底物，小珠漂浮在浓稠的5 M CsCl溶液中4小时后，使用β计数器测评磷酸化程度。使用Chocktide序列衍生的肽段作为(LRRWSLGL)测定Aurora A的底物, 然而优化的肽段Auroratide用于测定Aurora B和C。实验在96孔板上进行。测评混合物作用于Aurora激酶的效果，且测定IC50值。

细胞实验

Cell lines: HeLa,HCT116,HT29,LOVO,DU145,和NHDF细胞

Concentrations: 0.001-1.0 μM，溶于DMSO，浓度为10 mM，作为储存液

Incubation Time: 72小时

Method: 细胞按每cm2接种5×103到1.5×104个细胞接种到24孔板上。24小时后,用PHA-680632处理，在37oC下含5%CO2环境下温育72小时。最后,细胞从板上分离，使用细胞计数器计数。使用实验组生长百分数与对照组之比，计算IC50值。

(Only for Reference)

动物实验

Animal Models: 携带p53−/−HCT116 细胞移植瘤模型的雌性无胸腺裸鼠

Formulation: 溶于20% Tween-80，5% 葡萄糖溶液

Dosages: 40 mg/kg

Administration: 腹腔注射，每天两次

(Only for Reference)

参考文献

[1] Soncini C, et al. Clin Cancer Res, 2006, 12(13), 4080-4089.

[2] Tao Y, et al. Br J Cancer, 2007, 97(12), 1664-1672.