产品描述

JNJ-7706621是一种泛CDK抑制剂，对CDK1/2抑制作用最强，无细胞试验中IC50为9 nM/4 nM，作用于CDK1/2比作用于CDK3/4/6选择性高6倍以上。也能有效抑制Aurora A/B，对Plk1和Wee1没有抑制活性。

靶点（IC50 & Targe）

Aurora A,11nM

Aurora B,15nM

CDK1/CyclinB,9nM

CDK2/CyclinA,4nM

CDK2/CyclinE,3nM

体外研究

JNJ-7706621作用于CDK1和2具有高度有效性, IC50为3-9 nM。JNJ-7706621也抑制CDK3, 4,和6, IC50为58-253 nM。JNJ-7706621抑制Aurora-A和B，IC50分别为11和15 nM。JNJ-7706621也抑制VEGF-R2,FGF-R2,和GSK3β,IC50为154-254 nM。JNJ-7706621抑制一组人类癌细胞，包括HeLa,HCT-116,SK-OV-3,PC3,DU145,A375, MDA-MB-231, MES-SA,和MES-SA/Dx5, IC50为112-514 nM。JNJ-7706621抑制正常细胞系，包括MRC-5, HASMC, HUVEC,和HMVEC生长的效果低好几倍, IC50为3.67-5.42 μM。0.5-3 μM JNJ-7706621作用于HeLa或U937细胞,使细胞停滞在G2-M期,诱导核内复制，激活凋亡,且降低集落形成。[1]

体内研究

100或125 mg/kg JNJ-7706621处理携带A375恶性黑色素瘤人类肿瘤移植瘤模型的小鼠，导致肿瘤衰退。[2]

激酶实验

体外CDK1和Aurora激酶实验:

测定CDK1激酶活性,使用从杆状病毒纯化的CDK1/cyclin B复合体，使含组蛋白H1磷酸化位点的生物素化肽底物磷酸化。在链霉亲和素包被的96孔闪烁板上，通过观察33P-γ-ATP渗透进固定底物的降低量，测定CDK1抑制活性。在50 mM Tris-HCl (pH 8), 10 mM MgCl2, 0.1 mM Na3VO4, 1 mM DTT, 1% DMSO, 0.25 μM 肽,每孔 0.1 μCi 33P-γ-ATP, 和5 μM ATP混合物中稀释CDK1酶，然后在30oC下温育1小时。用含100 mM EDTA的PBS冲洗，终止反应，使用闪烁计数器计数。线性回归分析JNJ-7706621的抑制百分数，测定 IC50值。

细胞实验

Cell lines: HeLa, HCT-116, A375, SK-OV-3, MDA-MB-231, 和PC-3细胞

Concentrations: 1 nM-10 μM, 溶于DMSO

Incubation Time: 48小时

Method: 通过测定14C标记的胸甘渗透进细胞内新合成DNA的量而测定JNJ-7706621抑制细胞增殖的能力。细胞胰蛋白酶化，计数，然后每孔3-8×103个细胞加到96孔CytoStar组织培养闪烁板上，板上含100 µL完全培养基。细胞在完全培养基上37oC下温育24小时。然后，每孔加入1 µL JNJ-7706621。细胞再次温育24小时。甲基14C胸甘 56 mCi/mmol 在完全培养基中稀释，然后加入到CytoStar 板中，每孔加0.2 µCi。JNJ-7706621 和14C胸甘在板中37oC下温育24小时。移除板上的混合物，然后用200 µL PBS冲洗板冲洗2次。每孔加入200 µL PBS，用透明板密封装置在板顶端进行密封，用白色板衬垫密封板的底端。在Packard Top计数器上测定甲基14C胸甘渗透程度。

(Only for Reference)

动物实验

Animal Models: 携带A375细胞移植瘤模型的小鼠

Formulation: 溶于含溶于无菌水的0.1% Tween-80的0.5%甲基纤维素

Dosages: 100或125 mg/kg

Administration: 口服处理或腹腔注射

(Only for Reference)

参考文献

[1] Emanuel S, et al. Cancer Res, 2005, 65(19), 9038-9046.

[2] Seamon JA, et al. Mol Cancer Ther, 2006, 5(10), 2459-2467.

[3] Lin R, et al. J Med Chem, 2005, 48(13), 4208-4211.