产品描述

Reversine是一种强效human A3 adenosine receptor拮抗剂，Ki为0.66 μM，也是一种泛aurora A/B/C kinase抑制剂，IC50分别为12 nM/13 nM/20 nM。也用于干细胞分化。

靶点（IC50 & Targe）

A3,0.66μM(Ki)

Aurora A,12nM

Aurora B,13nM

Aurora C,20nM

体外研究

Reversine诱导肌原性谱系定向细胞成为多功能间质祖细胞，其增殖并重新分化为成骨和脂肪细胞。[1] Reversine，作为一种A3腺苷受体拮抗剂，在稳定转染的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中，竞争性抑制毛喉素刺激的cAMP产生。[2] Reversine抑制HCT116细胞中众所周知的Aurora靶点，组蛋白H3的磷酸化。此外，Reversine有效阻断多种肿瘤细胞的增殖，并诱导细胞死亡。在原代人肿瘤样品中，Reversine也会抑制白血病细胞的集落形成。[3]联合使用时，reversine和aspirin协同抑制宫颈癌细胞的生长，并诱导细胞死亡。[4]

体内研究

在接种U14肿瘤的小鼠体内，与对照组相比，Reversine (10 mg/kg i.p.)和aspirin引起肿瘤重量和体积更多的下降。[4]

激酶实验

放射性配体结合试验:

A3 AR竞争性结合测定中，每个试管含有100 μL膜悬浮液(20μg 蛋白质)，50 μL [125I]4-amino-3-iodobenzyl)adenosine-5′-N-methyluronamide (0.5 nM)，和50 μL 溶于Tris-HCl缓冲液(50 mM，pH 7.4)的逐渐增加浓度的测试配体，Tris-HCl缓冲液包含10 mM MgCl2 和 1 mM EDTA。非特异性结合使用10 mM 5′-N-ethylcarboxamidoadenosine在缓冲液中测定。混合物在25℃下培养60分钟。结合反应使用MT-24细胞采集器通过Whatman GF/B过滤器减压过滤终止。过滤器用9 mL冰预冷的缓冲液清洗3次。放射性使用Beckman γ计数器测定，计算抑制百分比。

细胞实验

Cell lines: HL-60，A375，HeLa，HCT-116，T47D，和 MCF-7 细胞系

Concentrations: ~10 μM

Incubation Time: 72小时

Method: 不同肿瘤细胞系的细胞活性使用ATPlite 1step进行评估。简而言之，逐渐增加数量的reversine存在下，每孔以2 × 104个细胞接种于96孔板。72小时后，将板恢复，且每孔加入100 μL ATPlite溶液。板在700 rpm下振摇2分钟，荧光使用EnVision多标记板阅读器测量。每个样品以一式三份进行分析。

(Only for Reference)

动物实验

Animal Models: 负荷 U14 肿瘤的小鼠

Formulation: DMSO

Dosages: 每3天，10 mg/kg

Administration: i.p.

(Only for Reference)

参考文献

[1] Chen S, et al. J Am Chem Soc. 2004, 126(2), 410-411.

[2] Perreira M, et al. J Med Chem. 2005, 48(15), 4910-4918.

[3] D'Alise AM, et al. Mol Cancer Ther. 2008, 7(5), 1140-1149.

[4] Qin HX, et al. Cytotechnology. 2013, 65(4), 643-653.