产品描述

Rucaparib (AG-014699,PF-01367338)是一种PARP抑制剂，无细胞试验中作用于PARP1的Ki为1.4 nM，对其余8个PARP位点也有结合亲和力。Phase 3。

靶点（IC50 & Targe）

PARP,1.4 nM (Ki, cell free)

体外研究

AG-014699有效抑制纯化的全长人类PARP-1，作用于LoVo和SW620细胞显示出强PARP抑制效果。AG-014699是AG14447的磷酸盐形式，且是第一个和temozolomide联用用于临床实验的PARP抑制剂。[1] AG-014699的辐射增敏性是由于下游NF-κB激活的抑制，及SSB修复抑制。AG-014699可以作用于DNA损伤激活的NF-κB，且克服传统NF-κB抑制剂的毒性，不会损害其他重要的炎症反应。[2]1μM AG-014699作用于D283Med细胞时抑制PARP-1活性达97.1%。[3]在NB-1691, SH-SY-5Y, 和SKNBE(2c)细胞中AG-014699明显增强Topotecan和Temozolomide的细胞毒性。[4]

体内研究

AG-014699无毒，明显增强D384Med移植瘤DNA修复功能蛋白中temozolomide诱导的TGD。药物动力学研究显示在脑组织中也检测到AG-014699，说明AG-014699用于治疗颅内恶性肿瘤具有潜在可能。[3]活体模型(NB1691和SHSY5Y移植瘤)研究显示AG-014699增强temozolomide的抗癌活性，产生彻底且持久的肿瘤衰退现象。[4]

激酶实验

激酶实验:

不同浓度(0到1μ)AG-014699作用于5×103D283Med 细胞，与只用DMSO处理5×103D283Med细胞相比，来测定PARP活性抑制率。参考GCLP验证试验的PAR标准曲线，在和NAD+及寡核苷酸(底物和激活剂)温育的6分钟期间，使用10H PAR抗体，通过PAR形成量的免疫检测，在细胞样本中测量最大程度刺激的PARP活性。

细胞实验

Cell lines: D425Med, D283Med和D384Med细胞

Concentrations: 0.4 μM

Incubation Time: 3或5天

Method: 髓母细胞瘤细胞系包含D425Med, D283Med，和D384Med细胞，分别按1×103, 3×103，和3×103密度接种在96孔板上。接种24小时(D384Med细胞)或48小时(D283Med和D425Med细胞)后，细胞用不同浓度temozolomide处理。培养3天(D425Med和D384Med细胞)或5天(D283Med细胞)后，通过XTT细胞增殖检测试剂盒检测细胞活力。用DMSO处理的对照组和0.4μ AG-014699处理的实验组的百分比表示细胞生长。计算temozolomide单独使用或者和AG-014699联用时的GI50值。Temozolomide单独使用时的GI50值和与AG-014699联用时的GI50值之比就是趋化因子50（PF50）值。

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动物实验

Animal Models: 携带D283Med移植瘤的CD-1裸鼠

Formulation: 盐水溶液

Dosages: 1 mg/kg

Administration: 腹腔注射，每天1次或4次

(Only for Reference)

参考文献

[1] Thomas HD, et al. Mol Cancer Ther, 2007, 6(3), 945-956.

[2] Kotz, J. SciBX 5(13); doi:10.1038/scibx.2012.323.

[3] Hunter JE, et al. Oncogene, 2012, 31(2), 251-264.

[4] Daniel RA, et al. Br J Cancer, 2010, 103(10), 1588-1596.

[5] Daniel RA, et al. Clin Cancer Res, 2009, 15(4), 1241-1249.