产品描述

SBE 13 HCl是一种有效的选择性PLK1抑制剂，IC50为200 pM，选择性比 Aurora A 激酶, Plk2 和 Plk3高4000多倍。

靶点（IC50 & Targe）

PLK1,200pM

PLK2,>66μM

PLK3,875nM

体外研究

SBE13降低各种癌细胞株的细胞增殖，并引起G2/M阻滞，随后使细胞凋亡。[1]在原代细胞中，SBE 13不损害细胞周期和原代细胞的增殖。[2] SBE13与Enzastaurin结合协同减少细胞增殖，并增强HCT116(p53-/-)细胞的凋亡诱导。[3]

激酶实验

激酶试验:

为测定Plk1和Aurora A激酶活性，胸腺嘧啶核苷双阻断法后，细胞在SBE13存在下释放13小时，然后裂解，并使用所诉的抗体使激酶从裂解物中免疫沉淀。简而言之，对每个免疫沉淀反应，800 µg总蛋白质分别与1.5 µg Plk1 抗体混合物，3 µg Plk2 抗体，3 µg Plk3抗体，或5 µg Aurora A抗体于4℃下在旋转器上培养2小时。免疫沉淀蛋白使用蛋白G琼脂株收集。Plk1，Plk2 和Plk3免疫沉淀物与1 µg酪蛋白和1 µCi γ32-PATP在37℃下于激酶缓冲液中培养30分钟。Aurora A免疫沉淀物与0.5 µl组蛋白和1 µCi of γ32-PATP在激酶缓冲液中室温下培养60分钟。激酶试验中的产物在10% Bis-Tris聚丙烯酰氨凝胶上分馏，磷酸化的底物暴露12-36小时后通过放射自显影术可视化。等量的免疫沉淀物用于蛋白质印迹分析以确保Plk1，Plk2，Plk3 或 Aurora A蛋白质在激酶反应中的相等用量。免疫沉淀的Plk1在SBE13存在下释放13小时后，使用λ蛋白磷酸酶去磷酸化，然后进行分析，并与内源性免疫沉淀的Plk1比较激酶活性。比较去磷酸化和未去磷酸化Plk1激酶的活性，计算去磷酸化的和"正常"内源性免疫沉淀的Plk1激酶活性之间的比率。

细胞实验

Cell lines: HeLa，A431，HCT-15，HT-29，MCF-7，U2OS，LN-229，SKW 6.4，PC-3，Det-562，SK-BR-3，SK-OV-3 和 A549nb 细胞

Concentrations: 100 μM

Incubation Time: 72小时

Method: 细胞接种1天后用SBE13处理。对照组细胞用正常培养基培养。SBE13的浓度范围为1 nM–100 µM。1 x 105细胞/6孔的生长率在处理24，48和72小时后计数细胞测定。细胞培养研究以一式三份在每个时间点进行。

(Only for Reference)

参考文献

[1] Keppner S, et al. Cell Cycle. 2010, 9(4), 761-773.

[2] Keppner S, et al. Cell Cycle. 2011, 10(4), 708-720.

[3] Lange L, et al. Oncotarget. 2014, 5(8), 2263-2275.