产品描述 GNF-5 是一种选择性的，变构的Bcr-Abl抑制剂, IC50为220 nM。 靶点（IC50 & Targe） Bcr-Abl,220nM 体外研究 GNF-5，与imatinib 或 nilotinib结合使用时，抑制体外耐药变异的出现，并在抗Bcr-Abl T315I突变体的生物化学和细胞试验中表现出额外的抑制活性。[1] GNF-5表现出有效的抗增殖活性，对wt-Bcr-Abl 和 E255K 突变型Bcr-Abl细胞的EC50 分别为430 nM 和 580 nM。[2] 体内研究 GNF-5 (100 毫克/千克)对异种移植和骨髓移植模型中野生型和T315I Bcr-Abl依赖性增殖显示出疗效。此外，GNF-5 (75 毫克/千克) 与nilotinib (50 毫克/千克)结合能够提高T315I Bcr-Abl BMT模型中总存活数。[1] 激酶实验 Abl 抑制的动力学特性: ATP/NADH-耦合测定系统以96孔格式用于确定Abl酪氨酸激酶催化的多肽磷酸化的初始速率。反应混合物包含20 mM Tris-HCl，(pH 8.0)，50 mM NaCl，10 mM MgCl2，2 mM PEP [[2-(膦酰氧基)-2-丙烯酸)和20微克 Abl 多肽底物(EAIYAAPFAKKK)，固定的或变化的(测定抑制剂动力学参数)抑制剂应用浓度，1/50的PK/LDH 酶(丙酮酸激酶/取自兔子肌肉的乳酸脱氢酶)的终反应体积，160 μM NADH，0.16 μM Abl，最后加入ATP启动反应。吸光度数据在340 nm下使用SpectraMax M5酶标仪每20分钟收集一次。 细胞实验 Cell lines: Ba/F3.p210 细胞 Concentrations: ~10 μM Incubation Time: 48小时 Method: Ba/F3.p210细胞通过转染IL-3依赖的小鼠造血Ba/F3细胞系得到，含有p210BCR-ABL 和 Bcr-Abl突变的pEYK载体。所有细胞系在含10%胎牛血清(FBS)的RPMI 1640中于5% CO2，37 °C下进行培养，并用1%左旋谷酰胺增补。亲代Ba/F3细胞也以类似方法培养，10% WEHI条件培养基作为IL-3源。转染的细胞系在培养基中培养，用25微克/毫升博来霉素增补。48小时的细胞增殖研究通过CellTiter-Glo试验获得。 (Only for Reference) 动物实验 Animal Models: Ba/F3.p210 异种移植小鼠模型 Formulation: PEG400/生理盐水，1:1 Dosages: ~100 毫克/千克 Administration: 口服 (Only for Reference) 参考文献 [1] Zhang J, et al. Nature. 2010, 463(7280), 501-506. [2] Deng X, et al. J Med Chem. 2010, 53(19), 6934-6946.