核酸电泳是研究核酸的重要手段,是鉴定、定量和纯化核酸片段的主要方法。核酸电泳染料是对电泳中核酸进行染色的试剂。
常见的染料如下表,我们通过灵敏度、稳定性、对DNA迁移的影响、安全性及适用性对各个染料进行对比,详情如下:
品名 | 灵敏度/稳定性 | 对DNA迁移的影响 | 安全性 | 适用性 |
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CelRed | 高/高 | 条带不弯曲,DNA片段不迁移 | 1、一种独特的油性大分子,不易挥发升华,不易吸入人体,不穿透细胞膜进入活体细胞内,安全无毒; 2、艾姆斯氏测试结果表明,CelRed在凝胶染色浓度下完全没有诱变性,因此完全没有致癌毒性。 | 通用大小片段电泳染色,与EB有相同的光谱特性,无需改变滤光片及观察装置,使用普通紫外凝胶透射仪或紫外凝胶成像系统观察即可,在300nm紫外光附近可得到最佳激发。 |
CelGreen | 高/高 | 条带不弯曲,DNA片段不迁移 | 1、一种独特的油性大分子,不易挥发升华,不易吸入人体,不穿透细胞膜进入活体细胞内,安全无毒; 2、艾姆斯氏测试结果表明,CelGreen在凝胶染色浓度下完全没有诱变性,因此完全没有致癌毒性。 | 通用大小片段电泳染色,适用于使用可见光凝胶透射仪或可见光凝胶成像系统观察。 |
Super Green I | 高/低 | 染料浓度较高时,条带容易弯曲,DNA片段迁移的现象明显 | 属花菁染料,能透过细胞膜进入活体细胞内,但容易生物降解,不会在体内残留,安全无毒。 | 100bp以上电泳染色,适用于使用254nm激发的紫外凝胶透射仪或可见光凝胶透射仪观察。 |
EB | 低/高 | 条带不弯曲,DNA片段不迁移 | 1、分子量小,易挥发升华,易吸入人体,不易生物降解,在体内长期残留; 2、艾姆斯氏测试结果表明,EB容易引起有机体突变,是一种强诱变剂,具有高致癌性。 | 100bp以上电泳染色,背景荧光信号高;使用普通紫外凝胶透射仪观察。 |
CelRed、CelGreen核酸染料——安全无毒,不致癌