CelRed、CelGreen核酸染料是结合于双链DNA双螺旋小沟区域的具有独特设计的荧光染料。可用于电泳前染色,对分子生物学中常用酶如Taq酶、逆转录酶、T4连接酶等无抑制作用。
图1 CelRed和CelGreen胶染法对比图
产品优势
与传统EB染料相比
- 不易挥发升华,不易吸入人体,不穿透细胞膜进入活体细胞内,安全无毒;
- 艾姆斯氏测试结果表明,染料在凝胶染色浓度下完全没有诱变性,因此完全没有致癌毒性。
产品列表
品名:CelRed nucleic acid gel stain, 10,000× concentrate in water
CelRed核酸染料, 10,000× 水溶液
货号:9184387 规格:0.5mL;1mL
品名:CelGreen nucleic acid gel stain, 10,000× concentrate in water
CelGreen核酸染料, 10,000× 水溶液
货号:9184389 规格:0.5mL;1mL
CelRed 与 CelGreen染料的区别(图1)
- CelRed染料:与EB有相同的光谱特性,无需改变滤光片及观察装置,使用普通紫外凝胶透射仪或紫外凝胶成像系统观察即可,在300nm紫外光附近可得到最佳激发。
- CelGreen染料:适用于可见光凝胶透射仪或可见光凝胶成像系统观察。
使用方法
方法1:胶染法
- 制胶时加入CelRed或CelGreen核酸染料。例如,每50mL琼脂糖溶液中加入5μL CelRed或CelGreen 10,000× 储液。
- 按照常规方法进行电泳。
注意事项:
- A、 此方法染色染料用量相对较少,500μL 染料大约可做100块50mL的胶。
- B、 由于CelRed及CelGreen具有良好的热稳定性,可在热的琼脂糖溶液中直接添加,而无需等待溶液冷却。摇晃、震荡或翻转以保证染料充分混匀,也可选择将储液加到琼脂糖凝胶。
- C、 如条带弥散或分离不理想,建议使用泡染法染色以确认是否与染料相关。如染色后问题依然存在,则说明问题与染料无关,请尝试降低琼脂糖浓度、选用更长的凝胶、延长凝胶时间等方法。
- D、 此方法不适合预制聚丙烯酰胺凝胶(需使用泡染法)。
方法2:泡染法
- 按照常规方法进行电泳。
- 用H2O将CelRed或CelGreen 10,000× 储液稀释约3300倍到0.1M NaCl中,制成3× 染色液。例如,将15μL CelRed或CelGreen 10,000× 储液和5mL 1M NaCl加入45mL H2O 中。
注意事项:
最佳染色时间根据凝胶厚度及琼脂糖浓度不同而略有不同。对于含3.5- 10%丙烯酰胺的凝胶,染色时间通常介于30min到1h,并随丙烯酰胺含量增加而延长。