分析化学实验技术贴：一文学会槐米中芦丁的提取、结晶与含量测定-百灵威

芦丁，也称为芸香苷，是一种广泛存在于植物中的黄酮类化合物。它在槐米中的含量高达12%～16%，是提取芦丁的理想原料。芦丁分子含有酚羟基，显酸性，可溶于稀碱液中，在酸液中沉淀析出，因此可以利用这一性质进行提取分离。芦丁易溶于热水和热乙醇，而较难溶于冷水和冷乙醇，这使得重结晶方法成为精制芦丁的有效手段。液相色谱法可用于测定芦丁的含量。

实验试剂

品名	CAS	货号
Rutin, from fructus sophorae, HPLC≥98% 芦丁	153-18-4	984341
Formic acid, 88%, for analysis 甲酸	64-18-6	923394 危化品
Methanol, 99.8%, HPLC/PREP 甲醇	67-56-1	982150 危化品
Ethyl acetate, 99%, for analysis 乙酸乙酯	141-78-6	966734 危化品

实验步骤

1、芦丁的提取（碱提酸沉法）

1)称取槐米20g，加入沸水400mL及1g硼砂，加热至微沸，调节pH至8～9，保持微沸30min，过滤沉淀，合并滤液。

2)滤液用浓盐酸调pH至4～5，静置12h，过滤沉淀，用冷水洗涤，得到芦丁的粗产物。

2、芦丁的精制

称量粗品芦丁的质量，悬浮于蒸馏水中，煮沸溶解，过滤，冷却滤液，静置析晶，干燥得到精制芦丁。

3、芦丁的纯化

1)称取粗芦丁产品，溶解于甲醇，加入硅胶，进行柱色谱分离。

2)用70%工业乙醇洗脱，收集洗脱液，进行薄层色谱鉴定，合并含芦丁的溶液，蒸馏后冷却析晶，得到纯化芦丁。

4、芦丁的鉴定

1)化学法鉴定：进行α-萘酚-浓硫酸反应、锆-枸实验、盐酸镁粉实验等。

2)薄层色谱鉴定：使用聚酰胺膜和不同展开剂，进行氨熏和三氯化铝显色剂显色。

3)紫外光谱法鉴定：溶解样品于甲醇，进行紫外光谱分析。

4)红外光谱法鉴定：取样品约1mg，进行红外光谱分析。

5)氢核磁共振法鉴定：将芦丁样品与芦丁标准品谱图对照。

5、芦丁含量测定（HPLC法）

1)配制芦丁标准品溶液，进行液相色谱测定，绘制标准曲线。

2)配制芦丁样品溶液，进行液相色谱测定，代入标准曲线计算含量。

实验小贴士:

为什么提取芦丁时用水作溶剂，而重结晶时用乙醇作溶剂？

提取芦丁时使用水作为溶剂是因为芦丁在热水中具有较高的溶解度，而在冷水中溶解度较低。这种溶解度的差异使得芦丁能够在加热时溶解，而在冷却后重新结晶析出，从而实现提取。重结晶时使用乙醇作为溶剂，是因为乙醇可以减少芦丁在溶液中的溶解度，有助于芦丁的结晶析出。此外，乙醇的挥发性有助于在干燥过程中去除溶剂，得到纯净的芦丁晶体。