RPMI 1640培养基是一种化学成分确定的基础培养基,含有 L-谷氨酰胺,适合多种哺乳动物贴壁细胞的生长。它不含蛋白质、脂类或任何生长因子,因此需搭配血清使用。
百灵威提供RPMI 1640液体培养基和干粉2种形式:
表1 RPMI 1640 细胞培养基指标
项目 | 指标 |
外观 | 红色透明液体 |
pH值 | 7.0-7.5 |
渗透压(mOsm/Kg) | 270-310 |
溶解性 | / |
内毒素(EU/mL) | <1.0 |
无菌检查 | 应无菌生长 |
细胞复苏
- 将 RPMI 1640 培养基置于 37℃,5% CO2的环境中预热 30min;
- 取出细胞冻存管,迅速转移至 37℃水浴中融化;
- 将融化的细胞悬液转移至含有 5-10ml 新鲜培养基的无菌离心管中;
- 800rpm 低速离心5min 后小心去掉上清;
- 用适量新鲜培养基重悬细胞,并转移至合适的培养容器中,添加适量血清,轻轻摇晃容器使细胞混匀后于37℃,5% CO2环境中进行培养;
- 在显微镜下观察当贴壁单层并且汇合度在 80%左右,进行传代。
细胞培养
- 取显微镜下观察生长良好、贴壁单层并且汇合度在80%左右的贴壁细胞,根据需要选择合适体积培养容器;
- 预热 RPMI 1640 培养基:将培养基置于 37℃,5% CO2的环境中进行预热 30min;
- 从培养容器中吸出旧培养基并丢弃;
- 用不含钙、镁的平衡盐溶液冲洗细胞 3 次;
- 向培养容器中加入 0.25% 胰蛋白酶-EDTA,室温孵育 2min(实际孵育时间因细胞株而异);
- 显微镜下观察解离情况,当解离程度超过90%时,倾斜培养容器使细胞上液尽快流出,随后加入适量预热的培养基吹打细胞层表面,使其分散;
- 800rpm 低速离心 5min 后小心去掉上清,使用适量预热的培养基重悬细胞并分装至新的培养容器中,随后加入适量新鲜培养基与血清;
- 轻轻摇晃容器使细胞混匀后转移至 37℃,5% CO2环境中进行培养。
产品列表
液体培养基
英文名称 | 中文名称 | 货号 |
Advanced RPMI 1640 | Advanced RPMI 1640 | 9328572 |
RPMI 1640 | RPMI 1640 | 9328571 |
RPMI 1640 Medium (ATCC modification) | RPMI 1640(ATCC 改良) | 9328573 |
RPMI 1640, no phenol red | RPMI 1640, 不含酚红 | 989480 |
RPMI 1640, no glutamine | RPMI 1640, 不含谷氨酰胺 | 989707 |
RPMI 1640, no glucose | RPMI 1640, 不含葡萄糖 | 929342 |
RPMI 1640, GlutaMAX Supplement | RPMI 1640, 含谷氨酰胺替代物 | 944610 |
RPMI 1640 Medium, GlutaMA Supplement, HEPES | RPMI 1640, 含谷氨酰胺替代物, 含HEPES | 688257 |
RPMI 1640, HEPES | RPMI 1640, HEPES | 913140 |
干粉
英文名称 | 中文名称 | 货号 |
RPMI 1640, powder | RPMI 1640 , 干粉 | 980112 |
RPMI 1640, HEPES | RPMI 1640,HEPES, 干粉 | 903756 |
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