全世界有超过1亿7千万人遭受丙型肝炎病毒(即HCV,一种单股正链RNA病毒)的感染。人体一旦遭受感染极有可能发展为类似慢性肝炎、肝硬化乃至肝癌等病。目前我国对HCV感染检测的常用手段为荧光定量PCR和ELISA酶联免疫法,但这些方法操作复杂、耗时且费用昂贵[1]。
近期研究表明,HCV RNA基因组高度保守区域存在功能核酸拓扑结构即G-四链体结构,这一发现为拓宽功能核酸的病毒组学研究和开发新型的HCV感染检测提供了思路。
G-四链体荧光染料是一类通过与核酸G-四链体结构选择性结合实现荧光信号增强的染料。但传统的核酸G-四链体探针跨细胞膜能力差,难以直接用于活细胞成像。
硫黄素T(ThT) 以其选择性好,光稳定性强及信噪比高的特点而被广泛应用于G-四链体荧光染料构建中。
湖南大学聂舟团队开发出一种基于硫黄素T(ThT,选择性好,光稳定性强及信噪比高)结构的新型活细胞核酸G-四链体靶向荧光探针——ThT-NE,通过靶向G-四链体结构实现RNA单链病毒(如丙肝病毒)基因组在宿主活细胞中的高灵敏成像,实现直接在活细胞中观察病毒RNA的时空动态分布信息,帮助研究人员实时观察病毒在细胞内的复制及细胞间相互感染的过程[1]。