线粒体自噬(mitophagy)是细胞清除损伤或衰老的线粒体，并循环利用其组成元素的过程。其与衰老、神经退行性疾病和癌症等诸多生理病理过程密切相关，因此线粒体自噬的研究具有重要意义。

目前，对线粒体自噬的研究主要采用2种方法：

• 抗体或荧光蛋白标记法
• 线粒体荧光探针和溶酶体荧光探针组合使用共同检测的方法

但两种方法都存在弊端，前者操作复杂，在活细胞中应用受到限制；而后者特异性较低。

中国科学院化学研究所刘祥军和邴涛副研究员研发的探针分子HQO 可精确定位线粒体，准确示踪线粒体自噬过程（图1）；为线粒体代谢过程提供新的研究方法，也为筛选线粒体自噬抑制剂或促进剂提供有效的工具。

它无需与其它探针分子组合使用，进入活细胞后选择性富集于线粒体；当线粒体发生自噬形成自噬溶酶体后其微环境pH下降，使HQO质子化；质子化后HQO的荧光激发和发射波长均发生红移（斯托克斯位移大于100 nm）。

由于微环境pH值的不同，使得HQO在线粒体和自噬溶酶体中呈现不同颜色荧光（图2），因而可以很好地区分正常线粒体和包被损伤线粒体的自噬溶酶体^[1]（见图1）。

图1 HQO示踪活细胞线粒体自噬过程原理图^[1]。

图2 HQO具有两个激发与相应发射波长，一个示踪线粒体，一个示踪自噬溶酶体，通过两个波长的变化来阐述自噬流进程^[1]。

百灵威向全球科学家提供刘祥军副研究员科研成果转化的荧光探针HQO：

货号：2668725

HQO, 95%
2 MG

产品使用说明

• 细胞的培养：将细胞种植于共聚焦培养皿中，根据不同实验需要种植相应细胞密度及培养相应时间。
• 诱导自噬、细胞染色和共聚焦成像：适当条件诱导自噬（如无血清培养基、PBS或者细胞自噬激活剂处理等），HQO（10 μM）加入无血清培养基中，37℃孵育10 min，PBS洗涤1-3次，共聚焦成像。559 nm激发，570-610 nm发射波长为示踪正常线粒体的荧光；635 nm激发，650-730 nm发射波长为示踪自噬溶酶体的荧光。

参考文献

1. Ying Liu, Jin Zhou, Linlin Wang, Xiaoxiao Hu, Xiangjun Liu, Meirong Liu, Zehui Cao, Dihua Shangguan and Weihong Tan. J. Am. Chem. Soc., 2016, 138 (38), pp 12368–12374.

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