血清灭活

1、何谓热灭活

一般以56°C，30min处理已解冻的血清，因为此加热步骤，可使补体去活化，而补体所参与的反应有：溶细胞活性，平滑肌的收缩，肥大细胞和血小板组胶的的释放，增强吞噬作用，淋巴细胞、巨噬细胞的趋化和激活。

2、关于胎牛血清的灭活

实验结果表明，对于大多数细胞，胎牛血清的热灭活并非必需。这种处理对细胞生长的促进作用微乎其微，甚至，由于高温处理可能损害血清质量，导致细胞生长速度减慢。此外，热处理后的血清中沉淀物明显增多，这些沉淀物在倒置显微镜下呈现为“小黑点”，容易误以为血清被污染。将血清置于37°C环境下，沉淀物还会进一步增加，让人误以为是微生物的繁殖。

因此，除非必要，可省略热处理步骤。既可节约时间，又可确保血清质量。

3、灭活温度问题

常规灭活建议：45°C—62°C，15min- 60min，常用条件：56°C热处理30min。

如何避免沉淀物的产生?

1、解冻血清时，请按照逐步解冻法(20°C至4°C至室温)，若血清解冻时改变的温度太大(如-20°C至37°C)，容易产生沉淀物。

2、解冻血清时，摇晃均匀，使温度及成分均一，减少沉淀的发生。

3、请勿将血清置于37°C太久。否则血清中许多较不稳定的成分会因此受到损害影响血清质量。

4、血清的热灭活容易造成沉淀物增多，若非必要，可不操作此步骤。详细可查看如上“热灭活”。

血清解冻后有絮状沉淀物出现的处理方法

原因众多，但较普遍的原因是由于血清中脂蛋白及血纤维蛋白的变性，但这些絮状沉淀物，并不影响血清本身的质量。

若欲去除，可将血清分装至无菌离心管内，以400G离心，上清液即可接着加入培养基内一起过滤。

不建议以过滤的方法去除，可能会阻塞过滤膜。

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