本实验使用高效液相色谱法（HPLC）来分离和测定饮料中的苯甲酸钠、山梨酸钾和糖精钠。这些添加剂在C18键合反相柱上可以得到较好的分离，并且在230nm的波长下有较好的紫外吸收峰，从而实现定性定量分析。

实验试剂

品名	CAS	货号
Ammonium hydroxide solution, CMOS-Ⅲ, 28 - 30% 氨水	1336-21-6	947185 危化品
Ammonium acetate, 98%, AR 乙酸铵	631-61-8	541006
Methanol, 99.5%, for analysis 甲醇	67-56-1	949300 危化品
Benzoic acid, 99.5%, AR 苯甲酸	65-85-0	991996
Sorbic acid, 99%, reference material 山梨酸	110-44-1	944925
Saccharin sodium, 98%, reference material 糖精钠	128-44-9	603647

实验步骤

1、样品处理

    称取5.00～10.0g汽水饮料样品，除去CO₂，调pH值约为7，加水定容，过滤。

2、色谱条件

    1)色谱柱：C18不锈钢柱。

    2)流动相：甲醇∶乙酸铵（0.02mol•L⁻¹ ）=5∶95。

    3)流速：1mL•min⁻¹ 。

    4)检测器：紫外检测器，波长230nm。

3、开机，平衡

    1)打开稳压电源，依次打开液相色谱仪主机、计算机主机和显示器。

    2)输入色谱条件，平衡色谱柱。

4、定性分析

    取标准使用液进行分离，以标准使用液峰的保留时间为依据进行定性分析。

5、定量分析

    1)直接比较法：比较待测物质的峰面积与标准品的峰面积。

    2)标准曲线法：制作标准曲线，根据峰面积查出含量。

6、样品分析

    取样品溶液进行分离，根据峰面积从标准曲线上查出含量。

实验小贴士:

流动相为什么要进行脱气？

    答：流动相进行脱气是为了去除溶解在流动相中的气体，以避免在色谱柱中形成气泡，影响色谱峰形和分离效率。

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