离子对色谱法（IPC）是一种使用反相高效液相色谱法（RP-HPLC）对离子和可电离分析物进行有效分离分析的技术。将离子对试剂（IPR）添加到流动相中，可增加分析物的保留时间，改善峰形并提升分离度。因此，离子对试剂已广泛应用于药物、食品、生物分子和环境分析。

如下为离子对试剂的具体应用示例：

阿格列汀和瑞格列药片中二甲双胍含量检测^[1]

固定相：反相C18柱（250 mm, 4.6 mm, 5 μm）

流动相：乙腈：磷酸盐缓冲液：水

离子对试剂：0.3%庚烷磺酸钠

检测器：UV

特性：

• 良好回收率
• 尖锐、清晰的色谱峰形
• 精确、可选择性, 环保
• 适用于此类药物常规质量控制
  
  

脱脂牛奶中酶促水解产物乳糖、葡萄糖和半乳糖的定量分析^[2]

固定相：反相C18柱

流动相：磷酸钠缓冲液：甲醇

离子对试剂：四丁基硫酸氢铵

检测器：UV、荧光

特性：

• 结果准确且可重复
• 保留时间短
• 与气相色谱法相比，制备过程更简单快捷（无需将糖转化为挥发性衍生物）
• 定量限（LOQ）和检测限（LOD）低
  
  

单链/双链RNA检测^[3]

固定相：无孔聚合物色谱柱和整体式聚合物毛细管柱

离子对试剂：各式传统或挥发性胺阳离子盐

检测器：荧光

特性：

• 高分辨率分离短链/长链RNA分子
• 分离用时低于十分钟
  
  

天然水样中硝酸盐和硫氰酸盐检测^[4]

固定相：反相C18柱

流动相：30:70甲醇：水（等梯度）

离子对试剂：0.08mM十六烷基三甲基溴化铵（HTAB）

检测器：UV

特性：

• 简单
• 灵敏，准确，可重现
  
  

参考文献

1. Mahrouse, M. A., Lamie, N. T. Experimental design methodology for optimization and robustness determination in ion pair RP-HPLC method development: Application for the simultaneous determination of metformin hydrochloride, alogliptin benzoate and repaglinide in tablets. Microchemical Journal 2019, 147, 691-706.
2. Erich, S., Anzmann, T., Fischer, L. Quantification of lactose using ion-pair RP-HPLC during enzymatic lactose hydrolysis of skim milk. Food Chemistry 2012,135(4), 2393-2396.
3. Dickman, M. J. Ion Pair Reverse-Phase Chromatography: A Versatile Platform for the Analysis of RNA. Chromatography Today 2011. 22 – 26.
4. Soleimani, M., Yamini, Y., Rad, F. M. A simple and high resolution ion-pair HPLC method for separation and simultaneous determination of nitrate and thiocyanate in different water samples. J. of Chromatographic Science 2012, 50(9), 826-830.
   
   

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