基因工程|E.coli感受态细胞的制备、 质粒DNA重组与转化

时间: 2023-09-19
作者: 百灵威
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基因工程|E.coli感受态细胞的制备、 质粒DNA重组与转化-百灵威

自然条件下诸多质粒都可通过细菌接合作用转移至新宿主内,但在人工构建的质粒载体中,大多缺乏此种转移所必需的mob基因,故不能自行完成从A细胞到B细胞的接合转移。如需将质粒载体转移进受体细菌,需诱导受体细菌产生一种短暂的感受态以摄取外源DNA。

转化(Transformation)是将外源DNA分子引入受体细胞,使之获得新遗传性状的一种方式。转化过程所用的受体细胞一般是限制修饰系统缺陷的变异株,即不含限制性内切酶和甲基化酶的突变体(Rˉ,Mˉ),它可以容忍外源DNA分子进入体内并稳定地遗传给后代。

实验步骤

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