Belinostat, 98%, a new type of HDAC inhibitor
贝利司他 , 98% , 一种新型HDAC抑制剂
产品编号
308034
CAS
纯度
98%
分子式
C15H14N2O4S
分子量
318.35
品牌
J&K
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10MG
上海: 4
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50MG
期货: 4~6 Weeks
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英文别名N-Hydroxy-3-[3-[(phenylamino)sulfonyl]phenyl]-2-propenamide
中文别名N-羟基-3-(3-苯基氨基磺酰基苯基)丙烯酰胺
MDL编码MFCD08064035

产品描述

Belinostat (PXD101)是一种新型HDAC抑制剂,无细胞试验中IC50为27 nM,对耐Cisplatin的肿瘤具有活性。

靶点(IC50 & Targe)

HDAC,27nM

体外研究

Belinostat抑制肿瘤细胞生长(包括A2780, HCT116, HT29, WIL, CALU-3, MCF7, PC3,及HS852),IC50为0.2到0.66 μM。Belinostat 作用于A2780/cp70 和2780AD细胞时活性很低, 这两个细胞是抗cisplatin和doxorubicin的A2780细胞衍生的。Belinostat通过PARP分裂和组蛋白H3/H4的乙酰化而诱导细胞凋亡。[1] Belinostat抑制膀胱癌细胞生长,尤其是5637细胞,细胞在G0-G1期积累, 在S期下降,在 G2-M期上升。[2] Belinostat抑制细胞生长的活性不受多重耐药表现型的影响, 但是docetaxel的活性明显受影响。Belinostat 可以增强docetaxel或carboplatin 抑制OVCAR-3和A2780细胞的活性。Belinostat作用于卵巢癌细胞系也增强微管乙酰化作用。[3] 最新研究显示 Belinostat在TGF-β信号依赖机制中激活蛋白激酶A 和降低survivin mRNA。[4]

体内研究

Belinostat按10mg/kg剂量处理A2780和A2780/cp70 移植瘤,明显延迟肿瘤生长,但是对动物体重没有影响。[1] 在鼠膀胱细胞中,Belinostat也诱导p21WAF1, HDAC 核心和细胞通讯基因。[2] Belinostat按100mg/kg剂量单独处理A2780移植瘤,产生抗癌功效,肿瘤抑制率(TGI)达47% ,这种抑制存在剂量依赖性。100 mg/kg Belinostat和40 mg/kg Carboplatin联用可以延迟肿瘤生长,从18.6 天到22.5 天。 [3] Bortezomib和Belinostat联用,明显抑制肿瘤,此外,作用于携带抗Bortezomib UMSCC-11A移植瘤的鼠显示肠胃毒性 。[5]

激酶实验

组蛋白脱乙酰基酶活性实验:

汇合培养,用冷PBS中冲洗2遍,按200×g 转速离心5分钟。 细胞悬浮在2体积的溶解 buffer 中,60 mm Tris buffer (pH 为7.4)包含30%甘油和450 mm NaCl,用干冰冻结,然后30oC水浴溶解,循环3次。细胞碎片按1.2×104g转速离心5分钟, 然后上清液储存于−80oC中。使用 [3H]乙酰 CoA,通过p300的重组蛋白包括次黄嘌呤-氨基喋呤-胸腺嘧啶域乙酰化组蛋白H4肽段 (序列为SGRGKGGKGLGKGGAKRHRK)。100 μg H4 肽段与次黄嘌呤-氨基喋呤-胸腺嘧啶buffer(buffer包含50 mM Tris HCl pH为8.0, 5% 甘油, 50 mM KCl, 和0.1 mM EDTA),1 mM DTT, 1 mM 4-(2-氨乙基) ,苯磺酰基氟化物, 1×蛋白酶抑制剂, 50 μL纯化的p300, 及1.85 m [3H]乙酰 CoA (4.50Ci/mmol)混合,最终体积为300 μL,在30oC温育45分钟。p300蛋白 和 20 μL 50% Ni-琼脂糖在4oC下温育1小时,然后离心分离。上清液上样到2 mL Sephadex G15 柱中。加入1毫升蒸馏水,收集三滴样片,重复加入蒸馏水直到体积为4-5 mL,收集40滴样片。用2 mL 闪烁液稀释3微升样片,在闪烁计数板上计数,用于鉴定包含标记肽段的样片。合并样片,测定1 μL组合样本,用于测定每个肽段的放射性。在150 μL buffer,2 μL 细胞抽提物,和2 μL Belinostat的混合液中进行反应。加入2 μL [3H] 标记的底物开始反应。样本在 37oC下温育45分钟,加入HCl 和乙酸(终浓度分别为0.72和0.12 M)终止反应。释放的[3H]乙酸盐加到750 μL of 乙酸乙酯中, 按1.2×104g转速 离心5分钟。上层 (600 μL) 转移到3 mL闪烁液,然后计数。

细胞实验

Cell lines: A2780, A2780/cp70, 2780AD, HCT116, HT29, WIL, CALU-3, MCF7, PC3,和HS852细胞

Concentrations: 0.016到10 μM

Incubation Time: 24小时

Method: 肿瘤细胞系(A2780, A2780/cp70, 2780AD, HCT116, HT29, WIL, CALU-3, MCF7, PC3,和HS852) 按8×104个细胞/25 cm2 瓶接种在5 mL 培养基中,温育48小时。用Belinostat (0.016 到 10 μm)处理细胞24小时。1 mL 胰蛋白酶/EDTA加到培养瓶中。细胞分离后,加入1 mL培养基,细胞再次悬浮。稀释细胞,按0.5-2×103个细胞/皿移到6cm Petri皿中。37oC下温育10到15天。用PBS冲洗细胞,溶于甲醇,用结晶紫染色,计数大于50个细胞的群落。通过IC50值计算敏感度。

(Only for Reference)

动物实验

Animal Models: 右侧腹皮下注射A2780, A2780/cp70和HCT116细胞的CD1 nu/nu鼠

Formulation: Belinostat 溶解在DMSO中,然后用水稀释,最终浓度10%

Dosages: ≤40 mg/kg

Administration: 腹腔注射

(Only for Reference)

参考文献

[1] Plumb JA, et al. Mol Cancer Ther, 2003, 2(8), 721-728.

[2] Buckley MT, et al. J Transl Med, 2007, 5:49.

[3] Qian X, et al. Mol Cancer Ther, 2006, 5(8), 2086-2095.

[4] Chowdhury S, et al. J Biol Chem, 2011, 286(35), 30937-30948.

[5] Duan J, et al. Mol Cancer Ther, 2007, 6(1), 37-50.

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